Sanger 시퀀싱: 슬롯 커뮤니티
Nevada Genomics Center에서는 Applied Biosystems SeqStudio Genetic Analyser의 분석과 함께 염료 종결자 Sanger 시퀀싱을 사용하여 DNA 시퀀싱을 제공합니다. Sanger 서열분석 반응은 다음과 같이 실행됩니다.단일 입문서.
다음 표에는 최적의 Sanger 시퀀싱 결과를 위해 권장되는 DNA 주형 및 슬롯 커뮤니티의 양이 나열되어 있습니다. 참고: 플라스미드 DNA의 경우 크기는 다음과 같습니다.전체플라스미드, 벡터 및 삽입. 플라스미드 DNA의 경우 플라스미드의 크기를 20으로 나누어 필요한 나노그램을 결정하는 "20으로 나누기 규칙"을 사용할 수 있습니다.
| 슬롯 커뮤니티 – 플라스미드 DNA | 슬롯 커뮤니티의 양 "20 규칙으로 나누기" |
슬롯 커뮤니티의 양 |
|---|---|---|
| 3000~5000bp | 150ng ~ 250ng | 2 피코몰 = 2uM 슬롯 커뮤니티 1ul |
| 5000~10,000bp | 250ng ~ 500ng | 10 피코몰 = 10uM 슬롯 커뮤니티 1ul |
| BAC, 코스미드, 포스미드 | 1μg (최대) | 20 피코몰 = 20uM 슬롯 커뮤니티 1ul |
| 슬롯 커뮤니티 – PCR 앰플리콘 | 슬롯 커뮤니티의 양 “50 규칙으로 나누기” |
슬롯 커뮤니티의 양 |
|---|---|---|
| 100~200bp | 4ng | 2 피코몰 = 2uM 슬롯 커뮤니티 1ul |
| 200~500bp | 10ng | 2 피코몰 = 2uM 슬롯 커뮤니티 1ul |
| 500~1000bp | 20ng | 2 피코몰 = 2uM 슬롯 커뮤니티 1ul |
| 1000~2000bp | 40ng | 10 피코몰 = 10uM 슬롯 커뮤니티 1ul |
| 2000bp | 50ng | 10 피코몰 = 10uM 슬롯 커뮤니티 1ul |