Sanger 시퀀싱 : 최적의 슬롯 커뮤니티 및 프라이머
Nevada Genomics Center에서 우리는 Applied Biosystems Seqstudio Genetic Analyzer에 대한 분석을 사용하여 염료 말단 제 Sanger 시퀀싱을 사용하여 DNA 시퀀싱을 제공합니다. Sanger 시퀀싱 반응은 A로 실행됩니다.단일 슬롯 커뮤니티.
다음 표에는 최적의 Sanger 시퀀싱 결과를 위해 권장되는 DNA 슬롯 커뮤니티 및 프라이머가 나와 있습니다. 참고 : 플라스미드 DNA의 경우 크기는입니다.전체플라스미드, 벡터 플러스 삽입. 플라스미드 DNA의 경우 "20 규칙으로 분할"을 사용하여 플라스미드의 크기를 20으로 나누어 필요한 나노 그램을 결정할 수 있습니다.
| 슬롯 커뮤니티 - 플라스미드 DNA | 슬롯 커뮤니티의 양 “20 규칙으로 나누기” |
슬롯 커뮤니티 양 |
|---|---|---|
| 3000 ~ 5000bp | 150ng ~ 250ng | 2 Picomoles = 2UM 슬롯 커뮤니티의 1UL |
| 5000 ~ 10,000bp | 250ng ~ 500ng | 10 Picomoles = 10UM 슬롯 커뮤니티의 1UL |
| Bacs, Cosmids, Fosmids | 1μg (최대) | 20 picomoles = 1ul of 20um primer |
| 슬롯 커뮤니티 - PCR Amplicons | 슬롯 커뮤니티의 양 “50 규칙으로 나누기” |
슬롯 커뮤니티 양 |
|---|---|---|
| 100 ~ 200bp | 4NG | 2 Picomoles = 2UM 슬롯 커뮤니티의 1UL |
| 200 ~ 500bp | 10ng | 2 Picomoles = 2UM 슬롯 커뮤니티의 1UL |
| 500 ~ 1000bp | 20NG | 2 Picomoles = 2UM 슬롯 커뮤니티의 1UL |
| 1000 ~ 2000bp | 40ng | 10 Picomoles = 10UM 슬롯 커뮤니티의 1UL |
| 2000bp | 50NG | 10 Picomoles = 10UM 슬롯 커뮤니티의 1UL |