7 장 : 오염 제거
생물학적 제제에 의해 오염 된 배양 및 물체의 오염 제거는 미생물 학적 실험실에서 일상적으로 수행됩니다. 오염 제거는 미생물 무료 슬롯 실무의 중요한 구성 요소이며 감염으로부터 실험실 직원 (및 기타)을 외부 환경으로 방출하는 데 도움이됩니다.
화학 소독
항균제를 사용한 작업 표면, 장비, 생물학적 무료 슬롯 캐비닛 및 기타 무생물 물체의 오염 제거를 소독이라고합니다. 몇몇 화학 물질은 소독제로 사용됩니다.
화학 소독에 대한 미무료 슬롯의 감수성은 물리적 구조와 물리적 상태에 따라 다릅니다 (예 :보다 저항성 포자 상태). 예를 들어, Mycobacteria의 왁스 외부 세포벽은 증가 된 저항을 제공합니다.
다음은 화학 소독제에 대한 미무료 슬롯의 저항 목록입니다.
- 박테리아 포자
Bacillus Anthracis
Clostridium sporogenes - MyCobacteria
Mycobacterium tuberculosis
nontuberculosis mycobacteria - 비 지질 또는 작은 바이러스
CoxSackievirus
Rhinovirus - 곰팡이
Cryptococcus spp.
Candida spp. - 식물성 박테리아
Pseudomonas aeruginosa
Staphylococcus aureus - 지질 또는 중간 크기 바이러스
Cytomegalovirus
B 및 C 바이러스
* 생물학적 무료 슬롯에서 적응 : 원리 및 관행, Fleming, D.O. 및 Hunt, D.L., eds, 4th Edition (2006), ASM Press, Washington, D.C.
공통 화학 소독제 중 일부에 대한 관련 정보는이 장의 끝에서 표 형식으로 요약되어 있습니다.
Autoclaving
오토 클래빙은 압력 아래 포화 증기 (약 15 psi)를 사용하여 최소 121 ° C (250 ° F)의 오토 클레이브에서 온도를 달성합니다. 오토 클레이브는 식물성 박테리아, 박테리아 포자 및 바이러스를 파괴하는 데 사용될 수 있습니다.
autoclaving의 효과를 결정하는 세 가지 요소가 있습니다 :
온도 -Autoclave는 약 15psi의 압력 하에서 증기를 사용하여 121 ° C 이상의 챔버 온도를 달성합니다. 오토 클레이브 챔버가 121 ° C에 도달 할 수 있지만, 부하 내부 가이 온도에 도달한다는 것을 의미하지는 않습니다.
시간 - 121 ° C의 챔버 온도에서 20 분의 최소 오토 클레이브주기 시간 (오토 클레이브 사이클이 시작 되 자마자 시간이 시작되지 않음)은 깨끗한 품목의 멸균에 권장됩니다. 그러나 오염 제거를 달성하는 데 필요한 총 처리 시간은 하중 컨테이너 (열 전달 특성), 하중에 포함 된 물의 양 및 하중의 중량을 포함한 여러 하중 계수에 따라 다릅니다.
접촉 - 스팀 포화는 최대 열전달에 필수적입니다. 증기는 부하의 모든 영역에 접촉해야합니다.
폐기 전에 무료 슬롯학적 폐기물을 오염시키기위한 특정 요구 사항이 있습니다. 보다13장: 생물학적 유해 피망 슬롯무료 슬롯학적 폐기물과 관련된 오토 클레이브 절차.
오토 클레이브 유지 보수 및 검사
autoclaves는 자격을 갖춘 기술자가 정기적으로 유지 관리하고 수리해야합니다. 또한 네바다 주법에 따르면 5 입방 피트보다 큰 내부 볼륨을 가진 오토 클레이브는 인증 된 검사관이 매년 검사해야합니다.네바다 대학교, 리노 오토 클레이브 무료 슬롯 매뉴얼.
건조 열
건조 열은 촉촉한 열 (Autoclaving)보다 덜 효과적입니다. 더 높은 온도와 더 긴 접촉 시간이 필요합니다.
화학 소독제 요약
테이블은 다음과 같습니다. 실험실 무료 슬롯 : 실험실 무료 슬롯 : 원칙 및 관행, 제 2 판 (1995), Diane O. Fleming, John H. Richardson, Jerry J. Tulis 및 Donald Vesley, eds., 미국 미생물 학, 워싱턴, D.C.
| 소독제 | 매개 변수 사용 | 식물성 세포에 대한 효과 | 친 유성 바이러스에 대한 효과 | 결절 bacilli에 대한 효과 | 소수성 바이러스에 대한 효과 | 박테리아 포자에 대한 효과 | 중요한 특성 | 잠재적 응용 프로그램 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 알코올 (에틸, 이소 프로필) |
conc. : 70-85% 연락 시간 : 10-30 분 |
매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 덜 긍정적 인 응답 | N/A | 눈 자극, 독성, 가연성, 유기물에 의해 비활성화 | 표면 - 작업 및 장비 |
| 염소 화합물 |
conc. : 0.05-0.5% (상업용 표백제 5%) 연락 시간 : 10-30 분 |
매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 덜 긍정적 인 응답 | 잔류 물을 남길 수 있습니다. 신랄한; | 유출, 장비 표면, 기기, 유리 제품, 수조 |
| 4 차 암모늄 화합물 |
conc. : 0.1-2% 연락 시간 : 10-30 분 |
매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | N/A | N/A | N/A | 유기물에 의해 독성, 비활성화 | 표면 (작업 및 장비), BSC, 바닥 유지 보수, 유리 제품, 도구 |
| 페놀 화합물 |
conc. : 0.2-3% 연락 시간 : 10-30 분 |
매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 덜 긍정적 인 응답 | N/A | 잎 잔류 물; 부식성, 피부, 눈 및 호흡기 자극제; | 표면 (작업 및 장비), BSC, 바닥, 유출, 유리 제품, 기기, 수조 |
| iodophor 화합물 |
conc. : 0.47% 연락 시간 : 10-30 분 |
매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 덜 긍정적 인 응답 | N/A | 잎 잔류 물; 부식성, 피부 및 눈 자극성; | 표면 (작업 및 장비), BSC, 유리 제품, 수조 |
| 포름 알데히드 (포르말린) |
conc. : 4-8% 연락 시간 : 10-30 분 |
매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 덜 긍정적 인 응답 | 잎 잔류 물; 피부, 눈 및 호흡기 자극제; | 다른 소독제보다 덜 효과적이지만 장비 표면, 유리 제품, 악기에 사용할 수 있습니다 |
| Glutaraldehyde |
conc. : 2% 연락 시간 : 10-600 분 |
매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 매우 긍정적 인 응답 | 잎 잔류 물; 피부, 눈 및 호흡기 자극제; | 장비 표면, 유리 제품, 기기 |
발암 물질로서 자극적 인 특성과 상태로 인해 포름 알데히드는 좋은 국소 배기 환기없이 사용해서는 안됩니다.
다음 정보는 특히 무료 슬롯학적 독소의 불 활성화와 관련이 있습니다
독소의 불 활성화는 그것이 비 기능적으로 렌더링되어 더 이상 독성 효과를 발휘할 수 없음을 의미합니다. 이는 무료 슬롯학적 물질의 불 활성화와 다르며, 이는 무료 슬롯학적 물질을 생존 할 수없고 성장, 복제, 감염 또는 질병을 유발할 수 없게한다.
선택된 독소의 자동 클레이브 불 활성화
BMBL. 다음 표는 다음과 같습니다. 미생물 및 생물 의학 실험실의 생체 무료 슬롯, 6 판 (2020), 미국 보건 복지부, 질병 통제 및 예방 센터, 국립 보건원
| 독소 | Steam Autoclave | 노트 |
|---|---|---|
| Botulinum Neurotoxin | 예 | 121 ° C에서 Autoclave는 모든 포자를 죽이기에 충분한 열이 침투하도록 보장합니다..9,10 |
| Staphylococcal enterotoxin | 예 | BONT에 대해 설명한 것과 유사한 장기 증기 오토 클레이브와 SE- 오염 된 재료의 폐기에 소각이 권장됩니다. |
| Ricin | 예 | 99%감소했습니다..7불순한 독소 제제 (예 : 원유 리신 식물 추출물)의 열 불 활성화는 다를 수 있습니다. 열-감염자 리신은 제한된 리폴딩 (<1%)을 통해 활성 독소를 생성 할 수 있습니다. |
| microcystin | 아니오 | 30 분 동안 17 lb 압력 (123º C)으로 Autoclaving LMW 독소를 비활성화하지 못했습니다.7,19LMW 독소의 모든 연소 가능한 폐기물은 815º C (1,500º F)를 초과하는 온도에서 소각해야합니다.. |
| saxitoxin | 아니오 | 30 분 동안 17 lb 압력 (123º C)으로 Autoclaving LMW 독소를 비활성화하지 못했습니다.7,19LMW 독소의 모든 연소 가능한 폐기물은 815º C (1,500º F)를 초과하는 온도에서 소각해야합니다.. |
| Palytoxin | 아니오 | 30 분 동안 17 lb 압력 (123º C)으로 Autoclaving LMW 독소를 비활성화하지 못했습니다.7,19LMW 독소의 모든 연소 가능한 폐기물은 815º C (1,500º F)를 초과하는 온도에서 소각해야합니다.. |
| 테트로도 톡신 | 아니오 | 30 분 동안 17 lb 압력 (121-132º C)을 사용하여 Autoclaving LMW 독소를 불 활성화시키지 못했습니다 .17,19 LMW 독소의 모든 연소 가능한 폐기물은 815 ° C (1,500º F)의 초과 온도에서 소각해야합니다. |
| T-2 Mycotoxin | 아니오 | 30 분 동안 17 lb 압력 (123º C)으로 Autoclaving LMW 독소를 비활성화하지 못했습니다.7,19LMW 독소의 모든 연소 가능한 폐기물은 815º C (1,500º F)를 초과하는 온도에서 소각해야합니다.. |
| Brevetoxin | 아니오 | 30 분 동안 17 lb 압력 (123º C)으로 Autoclaving LMW 독소를 비활성화하지 못했습니다.7,19LMW 독소의 모든 연소 가능한 폐기물은 815º C (1,500º F)를 초과하는 온도에서 소각해야합니다.. |
| Abrin | 예 | 참조20 |
| Shiga Toxin | 예 | 참조21,22 |
선택된 독소의 화학적 불 활성화
이 표는 다음과 같습니다. 미생물 및 생물 의학 실험실의 생체 무료 슬롯, 5 판 (2009), 미국 보건 복지부, 질병 통제 센터, 국립 보건원
nd는 사용 가능한 오염 제거 문헌에서“결정되지 않았다”를 나타냅니다.
| 독소 | NAOCL (30 분) | Naoh (30 분) | naocl + naoh (30 분) | 오존 처리 |
|---|---|---|---|---|
| Botulinum Neurotoxin | 0.1% 0.25 N)의 솔루션 및 C. 보툴리눔 또는 봉합의 작업 표면 및 유출에 권장됩니다. 차아 염소산염의 용액으로서 0.3-0.5 mg/L의 농도에서 염소는 물에서 빈 (혈청 형 B 또는 E 시험)을 빠르게 불 활성화시킨다 .20 이산화 염소는 절제자를 비활성화하지만 클로라민은 덜 효과적이다 .21. |
0.25 N | nd | 예 2 mg/L) 또는 분말 활성 숯 처리 정의 된 조건 하에서 물에서 완전히 불 활성화 (혈청 형 A, B 테스트) 20,22 |
| Staphylococcal enterotoxin | 0.5% SEB는 10-15 MI.23에 대해 0.5% 차아 염소산염으로 비활성화됩니다. |
0.25 N | nd | nd |
| Ricin | 1.0% 리신은 0.1-2.5% 범위의 NAOCL 농도에 30 분 노출 또는 0.25% NAOCL + 0.25 N NaOH.17의 혼합물에 의해 불 활성화되어 일반적으로 1.0% NAOCL의 솔루션, 실험실의 탈염에 효과적입니다. |
nd | 0.1% + 0.25N NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd |
| microcystin | ≥0.1% NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd | 0.25% + 0.25N NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd |
| saxitoxin | ≥0.1% NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd | 0.25% + 0.25N NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd |
| Palytoxin | ≥0.5% NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd | 0.25% + 0.25N NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd |
| 테트로도 톡신 | ≥0.5% NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd | 0.25% + 0.25N NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd |
| T-2 Mycotoxin | ≥2.5% NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 시험 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17.의 조합으로 99% 이상 불 활성화되었다. T-2 Mycotoxin 및 Brevetoxin의 경우, 액체 샘플, 우발적 유출 및 비전없는 폐기물은 4 시간 동안 0.25% N NaOH를 가진 2.5% NAOCL에 담가야합니다. T-2 mycotoxin 또는 brevetoxin에 노출 된 동물로부터의 케이지 및 침구는 4 시간 동안 0.25% NaOCL 및 0.025 N NaOH로 처리해야한다. |
nd | 0.25% + 0.25N NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd |
| Brevetoxin | ≥2.5% NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 시험 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17.의 조합으로 99% 이상 불 활성화되었다. T-2 Mycotoxin 및 Brevetoxin의 경우, 액체 샘플, 우발적 유출 및 비전없는 폐기물은 4 시간 동안 0.25% N NaOH를 가진 2.5% NAOCL에 담가야합니다. T-2 mycotoxin 또는 brevetoxin에 노출 된 동물로부터의 케이지 및 침구는 4 시간 동안 0.25% NaOCL 및 0.025 N NaOH로 처리해야한다. |
nd | 0.25% + 0.25N NAOCL의 최소 유효 농도는 독소 및 접촉 시간에 의존 하였다; 테스트 된 모든 LMW 독소는 2.5% NAOCL로 처리하거나 0.25% NAOCL 및 0.25N NAOH.17으로 처리하여 적어도 99%를 비활성화 하였다. |
nd |